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El tejido de la epidermis humana consta de 5 capas principales, desde la parte más basal hasta la más superficial: estrato basal, estrato espinoso, estrato granuloso, estrato lúcido y estrato córneo. La epidermis más externa tiene una estructura plana formada principalmente por queratinocitos. Esta capa, formada por queratinocitos cornificados, es una barrera contra sustancias que tienen el potencial de causar irritación, y los queratinocitos que contiene desempeñan un papel importante en la vigilancia inmunológica de la epidermis. Naturalmente, la inducción de la cascada inflamatoria en la irritación de la piel comienza en la capa superior, que es el primer lugar donde penetra el cosmético, el biocida o el producto químico crudo.
Los sistemas de pruebas de irritación cutánea (SIT) in vitro representan las propiedades bioquímicas y fisiológicas de la epidermis humana. Se realiza con modelos estructurados de epidermis humana (RhE).
El protocolo EpiDermTM SIT (EPI-200), aceptado en la Directiva de pruebas 439 de la OCDE sobre pruebas de productos químicos, se realiza con alta precisión. Este modelo ha sido patentado y probado por el Comité Asesor Científico (ESAC) del ECVAM como un sistema de modelo 3D in vitro para probar productos químicos, farmacéuticos y para el cuidado de la piel. La prueba de irritación debe realizarse para productos biocidas y cosméticos de tipo 1-11 que entran en contacto directo con la piel.
El protocolo de prueba consiste en exponer tejidos acondicionados al control positivo y al control negativo y producto problema durante 1 hora y eliminándolos después del período de exposición. Se finaliza con la determinación de la actividad de la enzima oxidorreductasa celular dependiente de NAD(P)H y de la actividad metabólica de las células mediante el método colorimétrico, basado en el método de ensayo MTT. En resumen, la determinación del potencial de irritación cutánea del producto a probar se basa en la viabilidad del tejido y debe ser realizada por expertos en la materia en laboratorios acreditados y autorizados.
