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Las especies de los géneros Alteromonas, Flavobacterium, Micrococcus, Staphylococcus y Pseudomonas, conocidas como lipolíticas, tienen la capacidad de hidrolizar los triglicéridos debido a la producción de lipasas extracelulares.
Las etapas de análisis generalmente se pueden enumerar de la siguiente manera:
• Inocular una placa de agar VBB presecada esparciendo 1 ml de la muestra sobre el agar.
• Colocar invertido placas a 5°C para Pseudomonas lipolíticas. por hasta 7 días y para bacterias lipolíticas mesófilas a 30°C por hasta 3 días. Se llena con solución de sulfato de cobre (0,1%) y se deja durante 15 minutos.
• Se vierte el reactivo de las placas y las placas se lavan suavemente con agua corriente durante 1 minuto para eliminar el exceso de sulfato de cobre.
• Cuando se produce la lipólisis, se debe formar un área de color verde azulado alrededor de las colonias debido a la formación de sales de cobre insolubles de ácidos grasos. Esto representa ácidos grasos libres resultantes de la lipólisis de la grasa.
• El número obtenido mediante el recuento de colonias se multiplica por la tasa de dilución y se divide por la cantidad de inoculación para calcular el número de bacterias lipolíticas.
La determinación de bacterias lipolíticas se puede realizar en diversos productos lácteos como mantequilla y nata.