Bepaling van lipolytische bacteriën

Soorten uit de geslachten Alteromonas, Flavobacterium, Micrococcus, Staphylococcus en Pseudomonas, bekend als lipolytica, hebben het vermogen triglyceriden te hydrolyseren dankzij de productie van extracellulaire lipasen.

De analysefasen kunnen in het algemeen als volgt worden weergegeven:
• Inoculeer een voorgedroogde VBB-agarplaat door 1 ml van het monster op de agar te verspreiden.
• Plaats omgekeerd platen bij 5°C voor lipolytische Pseudomonas. gedurende maximaal 7 dagen en voor mesofiele lipolytische bacteriën bij 30°C gedurende maximaal 3 dagen. Het wordt gevuld met kopersulfaatoplossing (0,1%) en 15 minuten bewaard.
• Het reagens wordt van de platen gegoten en de platen worden gedurende 1 minuut voorzichtig gewassen in stromend water om overtollig kopersulfaat te verwijderen.
• Waar lipolyse plaatsvindt, zou zich rond de kolonies een blauwachtig groen gekleurd gebied moeten vormen als gevolg van de vorming van onoplosbare koperzouten van vetzuren. Dit vertegenwoordigt vrije vetzuren die voortkomen uit de lipolyse van vet.
• Het getal verkregen door het tellen van de kolonies wordt vermenigvuldigd met de verdunningssnelheid en gedeeld door de inentingshoeveelheid om het aantal lipolytische bacteriën te berekenen.

De bepaling van lipolytische bacteriën kan worden uitgevoerd in verschillende zuivelproducten zoals boter en room.