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Il tessuto dell'epidermide umana è costituito da 5 strati principali, dalla parte più basale a quella più superficiale: strato basale, strato spinoso, strato granuloso, strato lucido e strato corneo. L'epidermide più esterna ha una struttura piatta costituita principalmente da cheratinociti. Questo strato, costituito da cheratinociti cornificati, costituisce una barriera contro le sostanze che possono causare irritazioni e i cheratinociti in esso contenuti svolgono un ruolo importante nella sorveglianza immunitaria dell'epidermide. Naturalmente, l'induzione della cascata infiammatoria nell'irritazione cutanea inizia nello strato più superficiale, che è il primo luogo in cui penetra il cosmetico, il biocida o la sostanza chimica grezza.
I sistemi di test di irritazione cutanea in vitro (SIT) rappresentano le proprietà biochimiche e fisiologiche dell'epidermide umana. Viene eseguito con modelli strutturati di epidermide umana (RhE).
Il protocollo EpiDermTM SIT (EPI-200), accettato nella direttiva di prova OCSE 439 sui test delle sostanze chimiche, viene eseguito con elevata precisione. Questo modello è stato brevettato e testato dal comitato consultivo scientifico dell'ECVAM (ESAC) come sistema di modello 3D in vitro per testare prodotti chimici, farmaceutici e per la cura della pelle. Il test di irritazione deve essere testato per i biocidi e i prodotti cosmetici di tipo 1-11 che entrano in contatto diretto con la pelle.
Il protocollo del test consiste nell'esporre i tessuti condizionati al controllo positivo e al controllo negativo e sostanza chimica in esame per 1 ora e rimuovendoli dopo il periodo di esposizione. Si conclude con la determinazione dell'attività dell'enzima ossidoreduttasi cellulare NAD(P)H-dipendente e dell'attività metabolica delle cellule utilizzando il metodo colorimetrico, basato sul metodo di dosaggio MTT. In sintesi, la determinazione del potenziale di irritazione cutanea del prodotto da testare si basa sulla vitalità dei tessuti e dovrebbe essere effettuata da esperti del settore in laboratori accreditati e autorizzati.