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Le specie dei generi Alteromonas, Flavobacterium, Micrococcus, Staphylococcus e Pseudomonas, note come lipolitiche, hanno la capacità di idrolizzare i trigliceridi grazie alla produzione di lipasi extracellulari.
Le fasi di analisi possono essere generalmente elencate come segue:
• Inoculare una piastra di agar VBB pre-essiccata distribuendo 1 mL del campione sull'agar.
• Posizionare capovolto piastre a 5°C per Pseudomonas lipolitico. fino a 7 giorni e per i batteri lipolitici mesofili a 30°C fino a 3 giorni. Viene riempito con una soluzione di solfato di rame (0,1%) e lasciato per 15 minuti.
• Il reagente viene versato dalle piastre e le piastre vengono lavate delicatamente in acqua corrente per 1 minuto per rimuovere il solfato di rame in eccesso.
• Dove avviene la lipolisi, intorno alle colonie dovrebbe formarsi un'area di colore verde bluastro dovuta alla formazione di sali di rame insolubili degli acidi grassi. Questo rappresenta gli acidi grassi liberi derivanti dalla lipolisi dei grassi.
• Il numero ottenuto mediante il conteggio delle colonie viene moltiplicato per il tasso di diluizione e diviso per la quantità di inoculazione per calcolare il numero di batteri lipolitici.
La determinazione dei batteri lipolitici può essere eseguita in vari prodotti lattiero-caseari come burro e panna.